Examinando por Autor "Díaz Tatis, Paula Alejandra"

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    PublicaciónAcceso abierto
    Análisis de la interacción proteína-proteína y el posible efecto de estabilización de MePATL3 por parte de XopAEXpm
    (Universidad de los Andes, 2026-01-15) Cortés Calderón, Santiago; Bernal Giraldo, Adriana Jimena; Zimmermann, Bárbara Hanna; Uribe Ardila, Jesus Alfredo; Díaz Tatis, Paula Alejandra
    La yuca (Manihot esculenta Crantz) es un cultivo de gran importancia socioeconómica afectado por la bacteriosis vascular conocida como Cassava Bacterial Blight (CBB), causada por Xanthomonas phaseoli pv. manihotis (Xpm). Durante la infección, Xpm transloca efectores bacterianos mediante el sistema de secreción tipo III para interferir con los mecanismos de defensa de la planta. Entre estos efectores, XopAE ha sido asociado con la supresión de la inmunidad basal, aunque sus mecanismos moleculares no están completamente caracterizados. Estudios previos identificaron a MePATL3, una proteína de la familia PATELLIN asociada a membranas y tráfico vesicular, como un posible interactor de XopAE. En este trabajo se confirmó y caracterizó la interacción proteína–proteína entre XopAE^Xpm y MePATL3 utilizando sistemas heterólogos de expresión. La interacción física fue validada mediante ensayos de captura por afinidad (pull-down) acoplados a análisis por inmunoblot. Adicionalmente, se evaluó la interacción intracelular mediante complementación bimolecular de fluorescencia (BiFC) en Nicotiana benthamiana; sin embargo, no se detectó señal, lo que podría deberse a limitaciones técnicas del sistema o a la dependencia de microdominios de membrana. Finalmente, ensayos de abundancia proteica en líneas SALK1 de Arabidopsis thaliana complementadas con MePATL3 e infectadas con Pseudomonas fluorescens portadora de XopAE mostraron un aumento consistente de MePATL3 en presencia del efector, sugiriendo un posible efecto estabilizador. En conjunto, estos resultados aportan evidencia sobre el papel de XopAE en la manipulación de proteínas asociadas a la membrana durante la infección.
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    PublicaciónEmbargo
    Xanthomonas phaseoli pv. manihotis effector XopAO1 targets two key proteins to suppress defense in Cassava
    (Universidad de los Andes, 2023-01-16) Castillo, Darwin Alexander; Germain, Hugo; Bernal Giraldo, Adriana Jimena; 52644215; Díaz Tatis, Paula Alejandra; Zimmermann, Barbara Hanna; Laboratorio de Interacciones Moleculares de Microorganismos Agrícolas (LIMMA)
    The Type Three Effector (TTE) protein AvrRpm1 of Pseudomonas syringae can contribute to pathogen virulence or induce an immune response in Arabidopsis, tomato, lettuce, and soybean by modifying their intracellular "guardee" plant protein, for example, AtRIN4. This triggers a resistance protein to halt pathogen proliferation. Other TTEs can directly interact with their host targets to bypass the plant immunity. Prior studies showed that Xanthomonas phaseoli pv. manihotis (Xpm), the causal agent of Cassava Bacterial Blight (CBB), uses the effector XopAO1 to suppress host Effector Triggered Immunity (ETI) and PAMP-triggered Immunity (PTI). Here, we used a yeast two-hybrid system and bioinformatic characterisation of two casava proteins and XopAO1 to investigate putative interactions involved in the development of CBB disease. Our results suggest that XopAO1 interacts with MeRIN4 and MeKinase full-length proteins. Also, we speculate that the XopAO1-MeRIN4 interaction is mediated by the ADP-ribosyl polymerase (PARP) domain in the N-terminal region of XopAO1, but domain-specific experimental interaction assays are needed. We also hypothesize that PARP-domain of XopAO1 might target either the C-NOI or the N-NOI domain of MeRIN4. Conversely, we determined that MeKinase harbours a protein kinase and NAF domains. At this point, we do not know the immunological consequences of XopAO1-MeKinase interaction, thus, further research will be required to elucidate this phenomenon.